Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:52 мин. • July 8th, 2025
Возьмем эмбрион крысы гиппокампа.
Добавьте трипсин. Инкубация для опосредования разрушения тканевого матрикса, ослабления клеток гиппокампа.
Разбавляем буфером. Инкубируйте для продолжения ферментативного пищеварения с трипсином.
Далее переложите тканевую массу в пробирку, содержащую среду. Повторяйте пипетку для механической диссоциации на отдельные клетки.
Затравочные клетки на покровных стеклах, покрытых поли-L-лизином, внутри культуральных планшетов.
инкубировать. Клетки гиппокампа прилипают к покрытым поверхностям. Нейроны развивают пластинку и удлиняют малые нейриты.
Далее нейриты разрастаются аксональными и дендритными отростками, образуя нейронную сеть.
Зрелые нейроны экспрессируют синаптические возбуждающие рецепторы, N-метил-D-аспартатные рецепторы или NMDAR.
После инкубации промойте покровные листы с помощью фильтрующего материала.
Добавьте разведенную сыворотку пациента с аутоиммунным энцефалитом. Аутоантитела связываются с нейрональными NMDAR.
Промойте буфером, а затем закрепите ячейки.
Добавьте меченные флуорофорами вторичные антитела, которые связываются с NMDAR-связанными аутоантителами.
Постирайте с буфером. Наденьте защитное стекло на монтажный носитель, содержащи
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео