Метод визуализации ПЭТ in vivo для обнаружения опухолей в мышиной модели с использованием радиоактивно меченных антител

Возьмите клетки рака предстательной железы и введите их подкожно обнаженной мышке с ослабленным иммунитетом под наркозом.

Отсутствие иммунного ответа позволяет введенным клеткам выживать и размножаться, образуя опухоль.

Опухолевые клетки сверхэкспрессируют простат-специфический мембранный антиген или ПСМА, белок клеточной поверхности.

Возьмите ПСМА-специфические антитела, конъюгированные с радиоиндикатором, и введите их внутривенно в хвост мыши-носителя опухоли.

Антитела достигают опухолевых клеток и связываются с ПСМА, маркируя опухоль.

Поместите мышь под наркозом в позитронно-эмиссионный томограф или ПЭТ-сканер и получите сканирование.

Полученное изображение показывает распределение радиоактивного индикатора с выделением участков с высоким поглощением антител, которые соответствуют локализации опухоли.

Самцам обнаженных мышей подкожно имплантируйте 5 x 10⁶ клеток рака предстательной железы LNCaP, позволяя им вырасти до 100-150-миллиметрового кубического ксенотрансплантата. Через три-четыре недели после прививки опухоли должны быть готовы.

Для визуализации разведите радиоиммуноконъюгат ⁸⁹Zr-DFO-J591 до концентрации 1 милликюри на миллилитр в 0,9% стерильном физиологическом растворе. Затем введите 200 микролитров раствора ⁸⁹Zr-DFO-J591 в боковую хвостовую вену мышей-носителей ксенотрансплантатов.

В желаемый момент времени визуализации обезболите мышь смесью 2% изофлурана и кислорода. Поместите мышь на подстилку для ПЭТ-сканера маленького животного. Проверьте анестезию методом «пальцы ноги», а на глаза мыши нанесите ветеринарную мазь, чтобы предотвратить высыхание во время анестезии.

Поддерживайте анестезию во время сканирования с помощью 1% газовой смеси изофлуран и кислород. После этого необходимо получить данные ПЭТ для мыши с помощью статического сканирования с минимальным числом совпадений 40 миллионов совпадающих событий, используя энергетическое окно от 350 до 700 килоэлектронвольт и временное окно совпадения в шесть наносекунд.