Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:54 мин. • July 8th, 2025
Возьмите микропланшет, содержащий грибок Candida tropicalis.
Клетки выделяют Sap2, протеолитический фермент, который расщепляет трансмембранный гликопротеин под названием Msb2, удаляя его ингибирующий домен.
Это заставляет грибок прилипать к дну и разрастаться в микроколонию дрожжевых и нитчатых форм. Клетки выделяют растворимые компоненты и биополимеры, инициируя образование биопленки.
Добавьте образец сыворотки, содержащий антитела, специфичные для Sap2, в выбранные лунки и инкубируйте в темноте.
Антитела связываются с Sap2 и нейтрализуют его активность, препятствуя жизнеспособности клеток и созреванию биопленки.
В необработанных лунках биопленка созревает в плотную сеть клеток и внеклеточный матрикс.
Отсадите жидкость, промойте биопленку и высушите пластину на воздухе. Добавьте хромогенный субстрат, и инкубируйте в темноте.
Жизнеспособные клетки, использующие мембраносвязанные оксидоредуктазы, восстанавливают субстрат до окрашенного продукта.
Перенесите цветную надосадочную жидкость и считайте впитывающую способность.
Более низкая абсорбция в лунках, обработанных сывороткой, указывает на антитело-опосредованное ингибирование биопленки.
Готовят серийные разведения термоинактивиро
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео