Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:31 мин. • July 8th, 2025
Начните с чашки для культивирования, содержащей фиксированные формалином, наполненные желатином криосекции тощей кишки мышей с пучковыми клетками с апикальными микроворсинками и катушкообразной сомой.
Умойте с буфером, содержащим моющее средство, чтобы проникнуть в клеточные мембраны.
Добавьте раствор для восстановления щелочного антигена. Инкубируйте для разрыва индуцированных фиксацией белковых сшивок, обнажая белки для окрашивания.
Нанесите блокирующий раствор для предотвращения связывания неспецифических антител.
Наложение первичных антител, нацеленных на актин-связывающий белок, специфически фосфорилированный в клетках пучка.
Удалите несвязанные антитела. Введите смесь флуорофор-конъюгированных вторичных антител, ДНК-связывающего красителя и фаллоидин-флуоресцентного конъюгата красителя.
Вторичные антитела связываются с первичными антителами, фаллоидин-флуоресцентный краситель конъюгирует актин, а ДНК-связывающий краситель помечает ядра клеток.
Удалите несвязанные компоненты и добавьте буфер без моющих средств.
Перенесите секцию на предметное стекло с клеевым покрытием, закрепив его с помощью носителя.
Под конфокальным микроскопом зеленые золотниковидные клетки с усиленной флу
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео