Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:18 мин. • July 8th, 2025
Возьмем срез мозга мыши, состоящий из зубчатой извилины гиппокампа, участка нейрогенеза, состоящего из предшественников нейронов на различных стадиях дифференцировки.
Переведите секцию в раствор, блокирующий пермеабилизацию. Молекулы детергента в растворе проникают в клетки, в то время как белки блокируют неспецифические сайты связывания.
Добавьте первичный коктейль антител, нацеленный на специфические маркеры нейрогенеза, белок, ассоциированный с микротрубочками, и промежуточный филаментный белок.
Удалите несвязанные антитела. Введение различных меченых флуорофорами вторичных антител, связывающихся с первичными антителами.
Добавьте сывороточные белки из того же хозяина в качестве одного из первичных антител, насыщая паратопы вторичными антителами.
Вводите моновалентные Fab-фрагменты, которые насыщают эпитопы сывороточных белков, предотвращая неспецифическое связывание.
Добавьте второе первичное антитело, поднятое тем же хозяином, связываясь с другим промежуточным филаментным белком.
Введение меченых флуорофорами вторичных антител, нацеленных на второе первичное антитело.
С помощью флуоресцентной микроскопии определить подтипы нейронов-предшественников, экспрессирующие уникальные к
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео