Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 5:04 мин. • July 8th, 2025
Начните с промывания неподвижного участка сердца в буфере из какодилата натрия, который стабилизирует структуру ткани. Погрузите срез в тетраоксид осмия, чтобы окрашивать липиды мембраны.
Обработайте ацетатом натрия для поддержания оптимального pH для окрашивания.
Добавляйте уранилацетат для окрашивания биомолекул, обеспечивая лучший контраст во время микроскопии.
Обезвоживайте ткани в возрастающих концентрациях этанола с последующим добавлением ацетона.
Погрузите ткань в смолу, получите ультратонкие срезы и перенесите их на сетку для микроскопии.
Введите метакарбонат натрия для удаления тетраоксида осмия, демаскирующего клеточный белок.
Соединение также окисляет гликопротеин, образуя реактивные альдегидные группы, которые нейтрализуются обработкой глицином.
Введите блокирующий буфер, предотвращающий связывание неспецифических антител.
Добавьте первичные антитела, специфичные к белку-мишени, а затем биотинилированные вторичные антитела.
Добавьте стрептавидин-конъюгированные квантовые точки, которые связываются с биотином.
Под электронным микроскопом области, меченные квантовыми точками, демонстрируют более высокий контраст, способствуя точной субклеточной локализации целевого белка
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео