Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:09 мин. • July 8th, 2025
Возьмем, к примеру, криосекцию биопсии кожи пациента с болезнью Паркинсона, заключенного в закладную среду.
Ткань состоит из наружного эпидермиса, нижележащей дермы и подкожного жира, иннервируемого нервами.
Промойте секцию, чтобы удалить закладную среду. Перенесите его в раствор, блокирующий пермеабилизацию, проникая в клетки и блокируя неспецифические сайты связывания.
Погрузите срез в первичный коктейль антител для достижения равномерного мечения антител, называемого свободно плавающим окрашиванием.
Антитела проникают в нейроны и связываются с альфа-синуклеиновыми агрегатами, распределенными по аксонам — агрегированной формой, характерной для нейродегенеративных заболеваний, — и карбоксил-концевыми гидролазами.
Введение флуорофор-конъюгированных вторичных антител, которые связываются с первичными антителами.
Обработайте флуоресцентным ДНК-связывающим красителем, который окрашивает ядро.
Поместите салфетку на предметное стекло, нанесите монтажную среду и запечатайте покровным стеклом.
Под конфокальным микроскопом флуоресценция обоих антител выявляет наличие агрегатов альфа-синуклеина вдоль аксонов дермальных нейронов.
Для начала заполните некоторые лунки свежей 96-луночной пласти
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео