Обнаружение циркулирующих антигликановых антител с помощью печатной гликановой матрицы
Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:57 мин. • July 8th, 2025
Начните с функционализированного гликочипа с напечатанными гликановыми субмассивами, организованными в блоки массивов.
Каждое пятно в подматрице представляет собой отдельный гликан — полимер на основе углеводов с вариациями в составе моносахаридов, длине цепи и характере ветвления.
Обработайте гликочип блокирующим буфером для блокировки неспецифических сайтов взаимодействия.
Перенесите гликочип и введите разведенную сыворотку мыши в буфер с добавкой сурфактанта, чтобы свести к минимуму агрегацию антител. Инкубируйте при перемешивании.
Перемешивание способствует равномерному распределению сыворотки крови, способствуя избирательному связыванию антигликановых антител со специфическими гликанами на основе различных молекулярных характеристик.
Промыть с уменьшающейся концентрацией буфера, содержащего поверхностно-активное вещество, для нарушения неспецифического связывания и смыть.
Наложите на гликочип вторичные антитела, конъюгированные с биотином мыши, взаимодействуя с предварительно связанными антигликановыми антителами, и промойте.
Ввести меченный флуорофорами стрептавидин, связывающийся с биотинилированными вторичными антителами. Промойте и удалите излишки раствора.
Отсканируйте гл
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео