Микрофлюидная картриджная система детектирования аллерген-специфического иммуноглобулина Е

Начните с микрофлюидного картриджа, оснащенного накопительными баками и однонаправленными насосами, которые подают реагенты по каналам в зону реакции.

Зона реакции содержит множество пятен, обездвиженных различными аллергенами.

Загрузите промывочный буфер, блокирующий буфер, пероксидаза-конъюгированные вторичные антитела и субстрат хемилюминесцентной пероксидазы в предназначенные резервуары.

Добавьте образец сыворотки, содержащий аллерген-специфический иммуноглобулин Е или IgE.

Начните анализ внутри хемилюминесцентного анализатора.

В зоне реакции блокирующий буфер перетекает и блокирует неспецифические участки взаимодействия.

Введение сыворотки позволяет IgE взаимодействовать с иммобилизованными аллергенами.

Промывка удаляет несвязанные IgE.

Затем пероксидаза-конъюгированные вторичные антитела поступают внутрь и взаимодействуют с иммобилизованными IgE.

Последующее промывание удаляет несвязанные антитела.

Затем анализатор вводит хемилюминесцентную подложку и перекись водорода.

Пероксидаза окисляет подложку, выделяя люминесценцию.

Интенсивность люминесценции в каждом пятне обеспечивает количественное указание на отчетливые аллерген-специфические IgE в сыворотке.

Чтобы проверить образцы сыворотки крови на антитела иммуноглобулина Е к целым аллергенам, случайным образом выберите три образца с содержанием сыворотки не менее 900 микролитров, а чип возьмите из набора, и пронумеруйте его. Затем включите компьютер и питание анализатора. Запустите программу LabIT на компьютере.

Если появится окно с предупреждением о темной раме, нажмите OK, чтобы запустить тест на утечку. Затем нажмите на центральный логотип, чтобы перейти в интерфейс управления. Проверьте температуру реакции и температуру устройства с зарядовой связью или ПЗС. Температура реакции должна подняться до 37 плюс-минус 1 градус Цельсия примерно за 10 минут, а температура ПЗС должна опуститься до минус 15 плюс-минус 1 градус Цельсия.

Когда температура ПЗС-матрицы опустится до минус 15 плюс-минус 1 градуса по Цельсию, убедитесь, что внутри прибора не осталось других предметов, и закройте дверцу. Затем нажмите «Инструменты», «Тест системы», «Тест на утечку». Когда тест будет завершен, появится окно отчета.

Затем загрузите 620 микролитров промывочного буфера, 120 микролитров блокирующего буфера, 60 микролитров конъюгатов А и В, 60 микролитров субстратов А и В и по 100 микролитров каждого образца сыворотки в соответствующие резервуары с реагентами на микрофлюидном картридже. После нажатия на идентификатор картриджа с помощью сканера штрих-кодов отсканируйте серийный номер картриджа и введите идентификатор образца. Затем поместите картридж в анализатор, закройте дверцу, нажмите «Анализатор» и бегите, чтобы начать анализ.