Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:05 мин. • July 8th, 2025
Начнем с трубки, несущей связанные с клетками мембранные частицы, называемые внеклеточными везикулами, или ВВ, которые демонстрируют уникальные антигенные композиции.
Введение магнитных наночастиц (MNP), содержащих антитела захвата, конъюгированные с флуоресцентно меченными Fab-фрагментами.
Инкубируются для облегчения взаимодействия между МНП со специфическими антигенами ВВ, образуя комплексы МНП-ЕВ.
Добавьте иммуноглобулин-G для блокирования сайтов связывания Fc, затем введите флуоресцентно меченые антитела для обнаружения для окрашивания других антигенов на захваченных частицах.
Загрузите эту смесь на предварительно промытую магнитную колонку, помещенную в магнитный сепаратор.
Магнитное поле удерживает захваченные MNP частицы внутри колонны. Замените буфер для удаления несвязанных антител.
Извлеките колонку из магнитного сепаратора, элюируйте захваченные MNP частицы с помощью буфера и зафиксируйте их для сохранения структурной целостности.
Анализируйте иммунозахваченные частицы с помощью проточной цитометрии; отчетливые сигналы флуоресценции от окрашенных антигенов коррелируют с уникальными антигенными характеристиками ВВ.
Начните с объединения 60 микролитров MNP для каждого усло
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео