Методика обнаружения штаммов цианобактерий с помощью микрочипа антител

0 просмотров3:31 мин • July 8th, 2025

Начните с микрочипа антител, на котором напечатаны специфические антитела.

Каждое пятно содержит уникальное антитело против определенного штамма цианобактерий.

Обработайте чип блокирующим буфером, чтобы свести к минимуму неспецифические взаимодействия.

Соберите чип в гибридизационную кассету, обладающую несколькими лунками.

Введите образец окружающей среды в лунки и инкубируйте его в оптимизированных условиях.

Образец содержит различные бактерии, в том числе различные штаммы цианобактерий, которые взаимодействуют со специфическими антителами на напечатанном чипе. Промойте чип, чтобы удалить несвязанные бактерии.

Добавьте смесь антител, содержащую меченые флуорофорами антитела к цианобактериальным штаммам, взаимодействующие со специфическими антигенами на соответствующих цианобактериальных клетках. Удалите несвязанные антитела.

Разберите кассету, промойте и высушите чип, затем отсканируйте его.

Флуоресценция в определенных пятнах указывает на присутствие определенных штаммов цианобактерий в образце.

Установите предметное стекло в кассету для гибридизации микрочипов размером 3 на 8 лунок, следуя инструкциям поставщика. В качестве альтернативы, после модификации шаблона печати антител, настройте кассету на заказ, как показано здесь, или просто используйте предметные стекла для обложки.

После сборки предметного стекла и кассеты внесите пипетку до 50 микролитров экстракта каждого образца или его разведения в экстракционном инкубационном буфере в каждую лунку кассеты. В качестве альтернативы можно загрузить образцы в другие инкубационные устройства или просто использовать крышечные стекла.

В качестве холостого контроля пипетируйте 50 микролитров буфера TBST-RR по крайней мере в две отдельные лунки кассеты. Инкубируйте образцы при температуре окружающей среды в течение 1 часа и перемешивайте путем пипетирования каждые 15 минут или инкубируйте при температуре 4 градуса Цельсия в течение 12 часов.

Чтобы промыть микрочипы, положите кассету вниз и осторожно постучите ее по чистой впитывающей бумаге. Затем промойте лунки, добавив в каждую из них 150 микролитров инкубационного буфера для экстракции, и удалите буфер, постучав по абсорбирующей бумаге, как и раньше. Повторите стирку еще три раза.

В каждую лунку добавьте 50 микролитров смеси флуоресцентных антител, содержащей 17 антител против цианобактериального штамма. Инкубируйте образцы при температуре окружающей среды в течение 1 часа или при температуре 4 градуса Цельсия в течение 12 часов.

Чтобы промыть микрочипы, осторожно положите кассету вниз и аккуратно постучите ее по чистой впитывающей бумаге. Затем добавьте 150 микролитров инкубационного буфера для экстракции, прежде чем удалить его, постучав по бумажному полотенцу. Повторите стирку три раза. Затем разберите кассету и погрузите предметное стекло в раствор 0,1x PBS для быстрого промывки. Быстро центрифугируете, как и раньше, чтобы высушить предметное стекло.

С помощью флуоресцентного сканера отсканируйте предметное стекло на флуоресценцию на максимальном пике излучения для дальнего красного флуоресцентного красителя. Сделайте несколько снимков микрочипов при разных параметрах сканирования, изменяя значение усиления.

09:05

Поток-модель Руководствуясь Изготовление высокой плотности штрих-кода антител Microarray

Похожие видео

0 Просмотры

10:44

Оснастки чип для кросс-reactivity-свободных и без корректировщик мультиплексированных Immunoassays сэндвич

Похожие видео

0 Просмотры

07:13

Раннее обнаружение цветения цианобактерий и связанных с ними цианотоксинов с использованием стратегии быстрого обнаружения

Похожие видео

0 Просмотры

09:32

ampliPHOX Колориметрические обнаружения на ДНК-микрочипов по гриппу

Похожие видео

0 Просмотры

05:04

Микрочип вирусного антигена для выявления изотипов антител в сыворотке крови против вирусного антигена

Похожие видео

0 Просмотры

04:57

Обнаружение циркулирующих антигликановых антител с помощью печатной гликановой матрицы

Похожие видео

0 Просмотры

12:24

ДНК-аффинно очищенного Чип (DAP-чип) Метод определения целей гена для бактериальных двухкомпонентный регуляторных систем

Похожие видео

0 Просмотры

10:16

Генерация двухцветного Antigen микрочипов для одновременного определения IgG и IgM Аутоантитела

Похожие видео

0 Просмотры

10:57

Экспериментальный протокол для обнаружения Цианобактерии В жидких и твердых образцах с антителом Microarray Chip

Похожие видео

0 Просмотры

09:12

Microarray Assay протеина для серологических определения антиген специфические антитела ответы следующие Clostridium difficile инфекции

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 29 августа 2026