Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:24 мин. • July 8th, 2025
Возьмите тюбик, содержащий суспензию кишечных бактерий человека.
Добавьте вирусоподобные частицы норовируса человека, или VLP. VLP содержат интактный вирусный капсид, но не имеют геномной РНК, что делает их незаразными для человека.
Во время инкубации белки капсида VLP связываются со специфическими углеводами, экспрессируемыми на поверхности бактерий, образуя комплексы VLP-бактерий.
Центрифуга для гранулирования комплексов и выброса несвязанных VLP.
Введите содержащий белок блокирующий раствор для блокирования неспецифических сайтов связывания антител, уменьшая фоновое окрашивание на последующих этапах.
Добавьте флуоресцентно меченые VLP-специфические антитела и инкубируйте.
Антитела связываются со своими сайтами-мишенями на капсиде VLP, помечая комплексы VLP-бактерий.
Центрифуга для гранулирования комплексов. Выбросьте несвязанные антитела и повторно суспендируйте гранулу в буфере для проточной цитометрии.
С помощью проточного цитометра можно обнаружить флуоресцентные сигналы, излучаемые комплексами VLP-бактерий, что позволяет количественно оценить процентное содержание связанных бактерий в образце.
После подготовки реагентов, антител и бактерий, как описано в рукописи, соберите в
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео