Измерение фагоцитарной эффективности макрофагов с помощью примахина и фотодинамической терапии

Начните с многолуночного планшета, содержащего адгезивные мышиные макрофаги — или фагоцитарные иммунные клетки.

Введите суспензию грибковых клеток Cryptococcus, взаимодействующую с рецепторами макрофагов и интернализующуюся через фагоцитоз.

Фагосома сливается с лизосомой, образуя фаголизосому. Кислая среда фаголизосомы способствует выживанию и размножению грибов.

Вводите в пробные лунки высокую концентрацию примахина — фотосенсибилизатора, в то время как в контроле фотосенсибилизатора не хватает. Инкубация для облегчения поглощения примахина макрофагами.

Подвергайте планшет воздействию ультрафиолетового света для фотодинамической обработки или ФДТ.

В испытательной лунке примахин образует радикальные катионы, которые взаимодействуют с молекулярным кислородом, образуя активные формы кислорода, или АФК.

АФК вызывают гибель грибков, в то время как антиоксидантные ферменты макрофагов нейтрализуют АФК, предотвращая повреждение клеток.

Проникают в макрофаги, высвобождая грибковые клетки.

Разложите разбавленное содержимое клеток по селективным агаровым пластинам, образуя отдельные колонии грибов.

Меньшее количество колоний на тестовой пластине по сравнению с контролем указывает на повышенн