Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 5:30 мин. • January 15th, 2026
Начните с серийно разбавленной сыворотки крови человека, содержащей различные концентрации нейтрализующих антител против коронавируса тяжелого острого респираторного синдрома 2 или SARS-CoV-2.
Введение псевдотипированных вирусов с люциферазной РНК, интегразой и обратной транскриптазой, инкапсулированных в липидный бислой, содержащий шиповидные белки SARS-CoV-2.
Антитела нейтрализуют вирусы на основе разведения сыворотки крови, при этом более низкие разведения демонстрируют максимальную нейтрализацию.
Введите клетки-мишени, экспрессирующие рецепторы ангиотензинпревращающего фермента-2 или рецепторы ACE2 и трансмембранную протеазу серин-2 или TMPRSS2.
При более высоких разведениях сыворотки ненейтрализованные вирусы взаимодействуют с рецепторами ACE2, в то время как TMPRSS2 расщепляет спайковый белок, обеспечивая слияние вирусов.
При поступлении РНК люциферазы обратно транскрибируется в ДНК, которая интегрируется в геном хозяина и продуцирует фермент люциферазу.
Замените среду буфером для анализа, содержащим субстрат люциферазы и лизирующий агент.
Клетки лизируются, высвобождая внутриклеточную люциферазу, которая взаимодействует с субстратом и производит высокую люминесценцию.
Количе
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео