Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 4:51 мин. • July 8th, 2025
Начните с многолуночного планшета, покрытого тестовой вакциной, и заблокируйте неспецифические участки взаимодействия.
Возьмите образец сыворотки крови у мыши, которой была введена исследуемая вакцина.
Эта сыворотка содержит иммуноглобулин G, или IgG, антитела, которые распознают исследуемую вакцину.
В лунки, покрытые вакциной, добавить последовательно разведенные образцы сыворотки.
IgG связываются с вакциной. Промойте, чтобы удалить несвязанные антитела.
Добавьте пероксидазу-конъюгированные вторичные антитела, которые связываются с IgG. Удалите несвязанные вторичные антитела.
Добавьте хромогенный субстрат. Пероксидаза взаимодействует с субстратом, образуя продукт синего цвета.
Введите кислоту, чтобы остановить реакцию. Изменение pH окрашивает раствор в желтый цвет.
С помощью спектрофотометра измерьте интенсивность цвета каждой лунки, чтобы определить концентрацию IgG в образце сыворотки крови.
Для покрытия антигеном иммуноферментного анализа, или планшета для ИФА, разбавьте антиген белка HI до 10 мкг на миллилитр раствором для покрытия и добавьте 100 мк разведенного антигена на лунку в планшете для ИФА. Инкубируйте тарелку при температуре 4 градуса Цельсия на ночь. После инкубации
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео