Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 5:23 мин. • July 8th, 2025
Начните с клеток пуповинной крови человека, включая CD34+ гемопоэтические стволовые клетки, или ГСК.
Добавляйте антитела для блокирования клеточных Fc-рецепторов, предотвращая неспецифическое связывание ГСК-специфичных магнитных шариков.
Введите покрытые антителами магнитные шарики, нацеленные на CD34+ ГСК. Центрифугируйте и выбросьте надосадочную жидкость.
Восстановите суспендию ячеек в буфере. Пропустите их через магнитный сепаратор для удержания связанных шариками ГСК; Через него протекают несвязанные клетки.
Снимите магнитное поле, чтобы собрать ГСК.
Центрифугируйте и ресуспендируйте клетки в питательной среде. Поместите клетки в тарелки и инкубируйте.
Среда содержит факторы роста и цитокины, способствующие выживанию и распространению ГСК.
Соберите клетки с прахом. Добавьте замораживающую среду, переложите в криовиал и заморозьте.
Чтобы создать мышиную модель иммунной системы человека, размораживайте ГСК. Добавьте их в предварительно подогретую среду.
Центрифугируйте и повторно суспендируйте клетки в буфере.
Клетки готовы к введению в детеныша мыши с иммунодефицитом для создания модели HIS.
Для начала суспендируйте CD34-положительную клеточную гранулу, выделенную из пуповинной
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео