JoVE Encyclopedia of Experiments
Иммунология
0 просмотров • 3:35 мин • July 8th, 2025
Начните с мыши, страдающей анестезией, не страдающей ожирением и иммунодефицитом, у которой отсутствуют различные иммунные клетки.
Мышь предварительно обрабатывают антителами для блокирования поверхностных рецепторов нейтрофилов и подавления иммунного ответа.
Иссеките кожу со спины мыши, не повреждая соединительную ткань, и создайте ложе для трансплантата.
Поместите расщепленную кожу человека, состоящую из эпидермиса и части дермы, на ложе трансплантата эпидермисом вверх.
Закрепите его клеем и перевяжите, чтобы свести к минимуму инфекции и сдержать ткань трансплантата.
Во время восстановления ткань трансплантата получает кислород и питательные вещества из кожи мыши, облегчая ее прикрепление.
Со временем между кожей человека и кожей мыши развиваются кровеносные сосуды.
Это помогает наладить циркуляцию и инфильтрацию иммунных клеток человека, добиваясь успешной пересадки кожи человека на мышиной модели.
После переноса мыши на операционную станцию простерилизуйте операционную область и накройте мышь стерильной полиэтиленовой пленкой. Вырежьте в пластике окно чуть большего размера, чем площадь прививки.
Крепко удерживайте донорскую кожу на месте тыльной стороной щипцов и отрежьте скальпелем прямоугольный участок донорской кожи размером 10 на 10 миллиметров, который будет пересажен вместе с щипцами. Оттяните кожу от тела, чтобы избежать глубоких порезов в фасции. Чтобы создать ложе для трансплантата, отрежьте прямоугольный участок кожи мыши, соответствующий размеру кусочка донорской кожи.
Затем поместите кусочек донорской кожи эпидермисом вверх на подготовленное ложе для трансплантата. Используя заднюю часть щипцов, манипулируйте кожей, скользя вперед и назад, пока донорская кожа не ляжет полностью ровно на ложе трансплантата.
Добавьте капли клея для хирургической клеевой ткани в месте соприкосновения донорской кожи с кожей мыши и удерживайте мышь и донорскую кожу щипцами в течение одной-двух секунд, чтобы клей прилип к тканям. Полностью запечатайте край прививки и дайте клею полностью высохнуть.
Далее разрежьте вазелиновую марлю достаточно большого размера, чтобы покрыть область прививки полностью. Накройте трансплантат вазелиновой марлей и слегка прижмите марлю к коже с помощью щипцов. Отрежьте полоску прозрачной пленочной повязки вдоль так, чтобы ширина была достаточно большой, чтобы покрыть рану мыши.
Плотно прижмите прозрачную пленочную повязку клейкой стороной вниз к марле. Быстро покатайте мышь, чтобы полностью обернуть повязку вокруг туловища, убедившись, что она плотно прилегает, не затрудняя дыхания, и все конечности свободны для движения.
Поместив мышь в клетку для восстановления, следите за ней, пока она не придет в состояние боевой готовности и не начнет двигаться. Обеспечьте источник тепла со стороны клетки в течение как минимум 15 минут после восстановления.