Основанное на миРНК ингибирование аутофагии в незрелых дендритных клетках, инфицированных вирусом простого герпеса

Возьмите две кюветы для электропорации. Одна кювета содержит небольшую интерферирующую РНК, или миРНК, предназначенную для ингибирования производства FIP200, белка, индуцирующего аутофагию.

Вторая кювета содержит скремблированную миРНК в качестве контроля, которая не ингибирует продукцию FIP200.

Добавьте незрелые дендритные клетки, или iDCs, электропорируйте для клеточного проникновения миРНК, а затем наложите пластины на клетки.

Интернализованная миРНК связывается с РНК-индуцирующим сайленсинговым комплексом.

Комплекс со специфичной для FIP200 миРНК расщепляет свою мишенную мРНК, ингибируя продукцию FIP200, в то время как контрольные iDC, обработанные миРНК, продуцируют FIP200.

Соберите клетки и добавьте вирус простого герпеса. При слиянии мембраны вирусной оболочки и клетки высвобожденная ДНК попадает в ядро и приводит к образованию вирусных белков и нуклеокапсидов.

Вирусные белки разрушают ядерные ламины. FIP200 образует комплекс, который запускает сигнальный каскад, индуцируя аутофагию разрушенных ламинов для их деградации и способствуя выходу вирусных нуклеокапсидов в цитоплазму.

МиРНК-опосредованное ингибирование продукции FIP200 ограничивает аутофагию ламина, предотвращая ус