Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 5:41 мин. • July 8th, 2025
Возьмем трансфекционные полиплексы, содержащие целевые плазмиды, связанные с полимером. Плазмиды кодируют вирусный антиген, слитый с пептидной меткой и аффинной меткой.
Инкубируйте полиплексы с клетками млекопитающих, которые интернализуют полиплексы внутри эндосом.
Полимер вызывает разрыв везикулы. Высвобождающиеся плазмиды экспрессируют вирусный антиген, который секретируется внеклеточно
.Соберите надосадочную жидкость, содержащую антиген и загрязняющие вещества. Добавьте конкурирующее средство в низкой концентрации.
Загрузите его на колонку аффинной хроматографии.
Аффинные метки связываются со смолой колонки, иммобилизуя антиген, в то время как конкурирующий агент уменьшает неспецифическое связывание.
Подайте конкурирующий агент в низкой концентрации, удаляя слабосвязанные загрязнения.
Промойте с увеличением концентрации конкурирующих агентов, чтобы вытеснить сильно связанные антигены, элюируя их.
Введите бактериальные наружные мембранные везикулы, или OMV, с поверхностно связывающим захватывающим белком и инкубируйте.
Пептидные метки антигена связываются с захватывающими белками, образуя вакцину OMV с мультивалентным антигенным дисплеем.
Выполните очистку OMV SpyCatcher. Начнит
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео