Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 2:43 мин. • July 8th, 2025
Начните с замороженного полимерного раствора, содержащего положительно заряженные полимеры.
Разморозьте полимерный раствор до тех пор, пока он не достигнет комнатной температуры.
Добавьте буфер и вихрь для равномерного перемешивания, получив однородный раствор.
Введите мишенную мРНК в раствор полимера в равном соотношении для оптимальной реакции.
Инкубируйте для того, чтобы положительно заряженные полимеры взаимодействовали с отрицательно заряженными фосфатными группами в мРНК посредством электростатических взаимодействий.
Это облегчает встраивание мРНК в структуру полимера, образуя наночастицы мРНК-полимерных комплексов или полиплексов.
Перенесите эти полиплексы в пробирку, содержащую воду, не содержащую РНКазы.
Смешайте их и дайте выпасть в осадок полиплексам.
Введите буфер, содержащий сахарозу, и заморозьте его. Сахароза действует как криопротектор, поддерживающий структурную целостность полиплексов.
Затем проведите сублимационную сушку, чтобы удалить любые следы воды.
Храните его при низкой температуре в качестве кандидата на мРНК-вакцину для будущего использования.
Для образования полиплексов разморозьте ранее приготовленные полимеры С-6 пептид поли-бета-аминоэфиров и вортекси
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео