Энциклопедия экспериментов JoVE
Иммунология
0 просмотров • 3:12 мин. • July 8th, 2025
Начните с суспензии Mycobacterium bovis BCG, обработанной неионогенным поверхностно-активным веществом, чтобы предотвратить слипание бактерий.
Далее добавьте реагент для биотинилирования и инкубируйте.
Этот реагент биотинилирования, представляющий собой комплекс биотина, объединенный в функциональный линкер, способствует связыванию молекул биотина с поверхностными белками бактерий, мечая бактерии.
После инкубации центрифугируйте меченую биотином бактериальную суспензию для удаления непрореагировавшего реагента биотинилирования.
Восстановите суспендию бактерий в буфере. Добавьте раствор авидин-фьюжн белка, рекомбинантного белка, содержащего целевой антигенный домен, слитый с мономерным авидином.
Во время инкубации авидин связывается с биотином, способствуя модификации бактериальной поверхности целевыми антигенами.
Центрифугируйте суспензию для удаления несвязанных гибридных белков.
Ресуспендируйте покрытые антигеном бактерии в буфере, содержащем неионогенное поверхностно-активное вещество. Антигенное покрытие бактерий может усилить их способность вызывать иммунные реакции.
Работайте в шкафу биобезопасности с использованием средств индивидуальной защиты, потому что БЦЖ является патог
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео