Почему внутрикожное введение имеет значение для доставки антигена в исследованиях вакцин?

Внутрикожная инъекция воздействует на антигенпрезентирующие клетки дермы, усиливая иммунный прайминг и обеспечивая измеримые локальные реакции, такие как образование папул, для валидации анализа.

Как ослабление спорозоитов с помощью облучения помогает в оценке иммунного ответа?

Ослабление радиационным облучением делает спорозоиты неинфекционными, сохраняя при этом их антигенную структуру, что позволяет безопасно оценивать иммунную активацию без риска развития патологии.

О чем свидетельствует образование папулы после инъекции антигена в дерму?

Появление видимой папулы подтверждает успешное внутрикожное введение и коррелирует с локальной иммунной активацией, служа показателем успешности процедуры.

Почему при иммунизации в оба уха делают несколько инъекций?

Множественные двусторонние инъекции увеличивают воздействие антигена и привлечение иммунных клеток, что повышает устойчивость и воспроизводимость показателей иммунного ответа.

Как мониторинг восстановления после инъекции влияет на качество данных в исследованиях по иммунизации?

Мониторинг восстановления обеспечивает благополучие животных и снижает иммунологическую вариабельность, вызванную стрессом, что способствует получению стабильных и надежных показателей иммунного ответа.

Внутрикожная иммунизация живыми аттенуированными спорозоитами на мышиной модели

JoVE Encyclopedia of Experiments

Иммунология

0 просмотров • 2:19 мин • July 8th, 2025

Начните с мыши, находящейся под наркозом, под стереомикроскопом, с нижней стороной одного из ушей мыши, закрепленной на сцене с помощью клейкой ленты.

Глаза покрывают мазью, чтобы предотвратить их пересыхание.

Возьмите с собой шприц, наполненный спорозоитной стадией малярийного паразита Plasmodium. Живые спорозоиты ослаблены радиацией, что делает их незаразными.

С помощью стереомикроскопа введите в верхнюю часть уха, проникая в самый внешний слой эпидермиса и высвобождая спорозоиты в дерму.

Перед снятием иглы ненадолго подержите иглу на месте, чтобы предотвратить обратный поток введенной суспензии.

Видимая припухлость в месте инъекции, называемая папулой, подтверждает успешную инъекцию.

Выполните несколько инъекций в одно и то же ухо.

Отпустите введенное ухо и повторите инъекции в другое ухо.

После инъекции дайте мыши восстановиться.

Введенные спорозоиты вызывают иммунный ответ, подготавливая иммунную систему против паразита.

Перед введением спорозоитов подтвердите надлежащий уровень седации подопытного животного путем пощипывания пальцев ног и нанесите глазную мазь для предотвращения высыхания роговицы. Затем, работая быстро, с помощью прозрачной ленты аккуратно зафиксировать вентральную сторону ушной раковины под стереомикроскопом, и загрузить шприц объемом 10 микролитров, оснащенный иглой 35-го калибра, 0,6 микролитра ресуспендированных паразитов.

Затем осторожно введите иглу скошенной стороной вверх под эпидермис на тыльной стороне уха и введите 0,15 микролитра спорозоитов в это место. В месте инъекции будет наблюдаться характерная папула. После введения дермы еще три раза, как только что продемонстрировано, осторожно снимите ленту и наблюдайте за мышью до полного ее восстановления.