Создание культуры первичных нейронов низкой плотности из замороженных эмбриональных нейронов

Начните с криовиала, содержащего криоконсервированные эмбриональные нейроны, и поместите его в нагревательный блок для контролируемого размораживания.

Затем перенесите размороженные нейроны в трубку и разбавьте их нейробазальной средой по каплям, чтобы сбалансировать осмотическое давление и предотвратить лизис клеток.

В результате образуется однородная суспензия с равномерно диспергированными нейронами.

Поместите разведенную нервную суспензию на многолуночный планшет, покрытый поли-L-лизином, содержащий нейробазальную среду, обогащенную питательными веществами и антибиотиками.

Инкубируйте для того, чтобы положительно заряженный поли-L-лизин взаимодействовал с нейронами посредством электростатических взаимодействий, способствуя их адгезии.

Снабжайте лунки свежими нейробазальными средами.

Инкубируйте клетки в одной и той же среде во влажных условиях, чтобы предотвратить испарение среды.

Эмбриональные нейроны используют питательные вещества и растут за счет развития нейронных процессов и формирования первичных нейронов.

Нейробазальная среда поддерживает первичные нейроны, которые кажутся широко разнесенными, генерируя первичную культуру низкой плотности с нейронными связями.

Начните с