Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:51 мин. • July 8th, 2025
Разрежьте кору головного мозга мыши на мелкие кусочки и переложите в холодную среду для препарирования, содержащую буферизованный раствор соли.
Добавьте пищеварительные ферменты для диссоциации внеклеточного матрикса.
Чтобы удалить остатки ферментов, промойте холодной средой для рассечения.
Замените эту среду средой, обогащенной астроцитами.
Далее с помощью пипетки диссоциируйте кусочки ткани.
Пропустите суспензию через ситечко, чтобы удалить недиссоциированную ткань и получить одиночные клетки.
Перенесите элементы на положительно заряженную пластину с полимерным покрытием. Инкубировать с встряхиванием.
Астроциты прочно прилипают, в то время как слабо связанные нейроны, микроглия и олигодендроциты отделяются.
Обогащающая среда превращает зрелые астроциты в делящиеся полигональные астроциты.
Удалите оторвавшиеся клетки и промойте астроциты фосфатным буфером.
Добавьте пищеварительные ферменты для отделения астроцитов.
Добавьте среду, содержащую сыворотку, чтобы остановить ферментативную активность. Соберите астроциты в пробирку и центрифугу.
Выбросьте надосадочную жидкость. Ресуспендируйте клетки в среде созревания астроцитов для поддержания типичной звездообразной зрелой структуры а
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео