Компартментализированная культура первичных нейронов мыши с использованием пластиковых микрофлюидных чипов

Возьмем пластиковый микрофлюидный чип, состоящий из соматических резервуаров и компартментов, а также аксональных резервуаров и компартментов, соединенных микробороздками.

Добавьте раствор для предварительного покрытия, чтобы пропитать отсеки и канавки, предотвращая попадание пузырьков воздуха.

Отсадите раствор, оставив основные отсеки заполненными. Постирайте с буфером.

Покройте лунки синтетическим полимером, который способствует адгезии нейронов. Промойте буфером и добавьте питательную среду, чтобы предотвратить высыхание чипа.

Чтобы засеять суспензию нейронов гиппокампа крысы, сделайте аспирацию среды.

Загрузите суспензию в соматические резервуары. Нейроны входят в соматический отдел и прикрепляются к нему.

Добавьте в лунки питательные среды для нейронов и инкубируйте. Факторы роста, присутствующие в среде, способствуют росту нейронов.

Постепенно нейроны расширяют свои аксоны, которые прорастают в аксональный компартмент через микробороздки.

Узость бороздок препятствует проникновению тел нейрональных клеток, обеспечивая физическое разделение соматической и аксональной областей.

Для начала поместите стерильный многокамерный чип в чашку Петри. Добавьте 100 микролитров раствора пре