Генерация нейрональных клеток из плюрипотентных стволовых клеток, полученных из крови

Возьмите микропланшет со стеклянными покровными стеклами, размещенный на дне лунок.

Введите положительно заряженный полимер, чтобы покрыть покровные стекла, и промойте, чтобы удалить любой несвязанный полимер. Обработайте белком внеклеточного матрикса, чтобы покрыть покровные стекла и аспирировать несвязанные белки.

Покрытие выступает в роли культурального субстрата, способствующего адгезии клеток.

Добавьте в лунки индукционную среду и введите суспензию плюрипотентных стволовых клеток, полученных из крови, или BD-PSCs. Эти клетки, способные дифференцироваться в различные типы клеток, образуются путем перепрограммирования клеток-предшественников крови.

Инкубируйте клетки, чтобы они прилипли к субстрату. Факторы роста и питательные вещества в индукционной среде трансформируют BD-ПСК в нейральные клетки-предшественники.

Ввести среду для дифференцировки, содержащую факторы роста нейронов, и провести инкубацию, запуская дифференцировку нейронных предшественников в нейронный фенотип, демонстрирующий расширенные клеточные процессы и межклеточные контакты.

Поместите стеклянные покровные стекла в 4-луночные планшеты и смажьте их 1-5 разведенным поли-L-орнитином в воде двойной дистилляции. П