Методика длительной инкубации нейронной ткани сетчатки

Возьмите неповрежденный глаз мыши в искусственной спинномозговой жидкости (aCSF) и сделайте надрез, чтобы изолировать наглазник, содержащий сетчатку.

Лечат ферментативным раствором для удаления внутренней пограничной мембраны, обнажая нейрональные клетки.

Погрузите ткань в раствор для торможения, чтобы остановить пищеварение, и промойте, чтобы удалить излишки раствора.

Поместите ткань в специализированный инкубатор при низкой температуре, чтобы замедлить клеточный метаболизм, сохранив ткань.

Этот инкубатор включает в себя основную камеру с сеткой для крепления салфеток. Камера заполнена кислотно-ликвором, а ее температура и pH контролируются для сохранения функциональности тканей.

Чтобы устранить микробное загрязнение, aCSF закачивается в другую камеру и обрабатывается ультрафиолетовым излучением для уничтожения любых микробов.

Затем стерилизованный аCSF закачивается обратно в основную камеру.

Чтобы изолировать сетчатку, извлеките наглазник, отделите сетчатку от окружающих тканей и верните ее в инкубатор.

Для подготовки целого монтирования сетчатки следует немедленно провести энуклеацию глаз от усыпленного животного. Сделайте небольшой надрез вдоль ora serrata и поместите глазки в