Создание ко-культуры клеток пульпы зуба и нейронов тройничного нерва для перекрестной коммуникации

Начните с мезенхимальной суспензии, богатой стволовыми клетками, полученной из ткани пульпы зуба мыши.

Инкубируйте для обеспечения адгезии и пролиферации клеток, образуя монослой.

Поместите пористую мембранную вставку, покрытую ламинином, в лунку, содержащую клетки пульпы зуба.

Засейте вкладыш сокультуральной средой, содержащей нейроны тройничного нерва, полученные из мозга мыши. Инкубируйте для присоединения нейронов.

Замените среду средой для совместного культивирования, содержащей регуляторы роста, такие как уридин и 5-фтор-2 дезоксиуридин.

Эти молекулы проникают в клетки и контролируют рост активно пролиферирующих мезенхимальных стволовых клеток, ингибируя синтез ДНК.

Со временем мезенхимальные клетки выделяют небольшие сигнальные молекулы, которые проходят через пористую мембрану для стимуляции нейронов тройничного нерва.

Эта стимуляция приводит к тому, что нейронные отростки тройничных нейронов удлиняются по направлению к мезенхимальным клеткам. Кроме того, нейроны выделяют сигнальные молекулы, обеспечивая перекрестную коммуникацию.

После усыпления мыши поместите голову на одноразовую пеленку так, чтобы рот был направлен к потолку, а основание шеи было ровно на рабочей поверх