Установление опухоли головного мозга в модели кокультуры органотипического среза

Начните со встроенного в агарозу кусочка мозга мыши.

Поместите срез мозга на мембранную вставку, содержащую питательную среду.

Погрузите ломтик в воду, чтобы обеспечить равномерное воздействие питательных веществ.

Соберите небольшой объем среды из вкладыша и перенесите его на дно лунки.

Удалите излишки среды из вкладыша.

Переложите вкладыш в чашку Петри, содержащую питательную среду.

Аккуратно удалите с ломтика края агарозы, чтобы сделать его доступным для последующих взаимодействий.

Поместите вкладыш в новую лунку, содержащую питательную среду, и инкубируйте ее, чтобы облегчить восстановление среза.

Добавьте в срез опухолевые клетки мозга человека и инкубируйте.

Опухолевые клетки взаимодействуют с клетками мозга и микроокружением внутри среза, инициируя размножение и создавая 3D-модель совместного культивирования.

С помощью шумовки поместите ломтик мозга в носитель на вкладыше и аккуратно надавите на ломтик, чтобы он полностью погрузился в воду. Повторите процедуру для всех ломтиков. Далее вытащите один миллилитр среды для срезов культуры из верхней части вкладыша и выдавите его на дно лунки.

Удалите и выбросьте излишки среды до тех пор, пока не станут видны края агарозы вокруг ср