Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 6:18 мин. • July 8th, 2025
Возьмем, к примеру, перфузию мозга мыши, содержащую опухоль.
На этапе перфузии удаляются циркулирующие иммунные клетки, но сохраняются инфильтрированные опухолью клетки.
Изолируйте ткань, содержащую опухоль.
Теперь механически диссоциируйте ткань.
Механическая сила разрыхляет ткани, высвобождая клетки.
Перенесите диссоциированную ткань в трубку.
Центрифугируйте и выбросьте надосадочную жидкость, содержащую мусор.
Ресуспендируйте ткань в растворе для пищеварения, содержащем коллагеназу и ДНКазу.
Коллагеназа разрушает внеклеточный матрикс, высвобождая клетки. ДНКаза разрушает загрязняющую ДНК.
Добавьте буфер для остановки ферментативной активности.
Отфильтруйте суспензию, чтобы удалить клеточные агрегаты и получить одноклеточную суспензию.
Центрифугируйте и выбросьте надосадочную жидкость.
Ресуспендируйте клетки в среде с высокой плотностью градиента. Теперь наложите на градиентную среду с более низкой плотностью, сформировав градиент разделения с понятной границей.
Центрифуга для разделения слоев. Иммунные клетки собираются на границе между градиентными средами, в то время как клеточный мусор плавает наверху.
Соберите иммунные клетки для дальнейшего анализа.
В этой процедуре, исполь
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео