Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:01 мин. • July 8th, 2025
Возьмите предварительно промытые сенсорные ганглии в пробирку.
Добавьте диссоциационный раствор, содержащий смесь пищеварительных ферментов, и инкубируйте.
Эти ферменты разрушают внеклеточный матрикс, высвобождая отдельные клетки.
После инкубации удалите диссоциационный раствор.
Промойте ганглии фосфатным буфером, и добавьте свежий раствор для диссоциации.
Проводите пипеткой ганглии вверх и вниз, чтобы диссоциировать клетки.
Пропустите суспензию через сетчатое фильтр, чтобы удалить комки.
Соберите все оставшиеся клетки со дна ситечка и поместите их в пробирку.
Нанесите клеточную суспензию на пробирку с градиентом плотности и центрифугу.
Исходя из различий в форме и массе, клетки мигрируют в нижний слой, в то время как клеточный мусор остается в верхнем слое.
Выбросьте верхний слой.
Добавьте свежую среду в оставшуюся клеточную суспензию и центрифугуйте.
Выбросьте надосадочную жидкость и сохраните клетки сенсорных ганглиев для дальнейшего использования.
После забора сенсорных ганглиев аспирируйте 500 микролитров раствора диссоциации ганглиев из каждой пробирки, не нарушая ганглии. Далее добавьте по 1 миллилитру PBS в каждый образец и подождите, пока ганглии осядут на дно пробирок.
За
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео