Разработка модели трехклеточной культуры гематоэнцефалического барьера человека

Начните с добавления перицитов на нижнюю сторону луночного вкладыша.

Накройте лунку-вкладыш планшетом для культуры и инкубируйте.

Перициты прикрепляются к мембране лунки-вставки, образуя одноклеточный слой или монослой.

Возьмите другую тарелку для культуры.

Добавьте в лунку человеческие астроциты в подходящую среду. Затем инкубируйте тарелку.

Астроциты прикрепляются к дну лунки и образуют монослой.

Выбросьте среду и добавьте свежую астроцитарную и перицитарную среду.

Теперь возьмем культуральную пластину, содержащую лунку-вкладыш со слоем перицитов.

Переверните пластину и перенесите лунку-вставку в лунку, содержащую слой астроцитов.

Добавьте эндотелиальные клетки человеческого мозга на верхнюю сторону лунки и инкубируйте.

Эндотелиальные клетки прикрепляются к лунной вставке, образуя систему тройных клеточных культур, которая напоминает гематоэнцефалический барьер, важнейший интерфейс, разделяющий кровоток и мозг.

Начните с культивирования HBVP в колбах для культур T75 с активированной поверхностью для клеточной адгезии в инкубаторе с 5% углекислым газом при температуре 37 градусов Цельсия до слияния. Как только слияние будет достигнуто, аспирируйте старую паразитарную среду и промо