Метод 3D-биопечати кортикальных астроцитов мышей

Возьмите суспензию астроцитов.

Добавьте раствор биочернил, содержащий желатин, фотосшиваемые производные желатина, фотоинициаторы, фибриноген и ламинин.

Перенесите суспензию в шприц с помощью тупой иглы.

Охладите шприц для желирования биочернилами. Подсоедините шприц к печатающей головке биопринтера.

Расположите иглу соответствующим образом к культуральной пластине. Инициируйте биопечать с заданными параметрами и дизайном.

Биочернила, содержащие астроциты, выталкиваются из иглы и послойно наносятся на пластину, образуя трехмерную структуру с захваченными астроцитами.

Подвергните биопечатную конструкцию воздействию ультрафиолета. Фотоинициатор способствует сшиванию производных желатина, повышая стабильность биоконструктов.

Лечить тромбином и ионами кальция.

Тромбин с ионами кальция превращает фибриноген в фибрин, собираясь в стабильную 3D-биополимерную сеть.

Сбросить раствор и промыть буфером, чтобы удалить сшивающие агенты.

Добавьте астроцитарную среду и инкубируйте. Ламинин способствует адгезии и распространению астроцитов, образуя трехмерную нейроноподобную ткань, богатую астроцитами.

Чтобы получить конечную концентрацию 1 х 10⁶ клеток на миллилитр, перенесите 1 миллилитр раствор