Получение органоидной культуры из суспензии клеток опухоли головного мозга

Начните с микроцентрифужной пробирки, содержащей богатый ламинином внеклеточный матрикс или lrECM. Ламинин является структурным компонентом, в изобилии присутствующим в головном мозге.

Держите трубку на льду, чтобы предотвратить полимеризацию IrECM.

Добавьте клетки опухоли мозга и тщательно перемешайте, чтобы обеспечить равномерное распределение клеток.

Далее переложите смесь на парапленочные формочки, формируя капельки.

Инкубируйте для облегчения полимеризации lrECM с образованием каркаса, имитирующего естественную среду клеток.

Теперь промойте затвердевшие органоиды в чашке Петри, содержащей питательную среду, затем инкубируйте.

Питательная среда обеспечивает организм необходимыми питательными веществами и факторами роста, поддерживая деление клеток.

Внутри органоида клетки самоорганизуются, мигрируя и вторгаясь.

После инкубации наклоните тарелку, чтобы осядли органоиды.

Осторожно удалите лишнюю среду и добавьте свежую среду.

Инкубировать с легким встряхиванием.

Это равномерно распределяет питательные вещества и усиливает рост органоидов.

Чтобы получить органоиды из одноклеточной суспензии, добавьте соответствующее количество богатого ламинином внеклеточного матрикса или lrECM в