Метод кокультуры для моделирования нейрон-олигодендроцитарных взаимодействий
Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:26 мин. • July 8th, 2025
Возьмем, к примеру, индуцированные человеком нейроны, или iN, культивируемые на внеклеточном матриксе.
Удалите среду и добавьте пищеварительные ферменты, которые нарушают работу матрикса, диссоциируя клетки.
Переложите внутримышечные имплантаты в трубку. Центрифугируйте суспензию и выбросьте надосадочную жидкость, содержащую ферменты.
Ресуспендируйте iN в среде для совместной культивирования; перенесите их в культуру индуцированных клеток-предшественников олигодендроцитов, или iOPC.
iOPC являются предшественниками олигодендроцитов, которые образуют миелиновые оболочки вокруг аксонов нейронов.
После инкубации iOPC образуют синаптические связи с iN. Трофические факторы, высвобождаемые iOPC и факторами роста в этой среде, способствуют созреванию iN в нейроны, демонстрируя усиление клеточных процессов, которые формируют синаптические связи с другими нейронами.
Электрическая активность зрелых нейронов и факторов роста в среде индуцирует созревание iOPC в олигодендроциты.
Олигодендроциты удлиняют клеточные отростки, образуя миелиновые оболочки вокруг аксонов нейронов.
Созданная сокультура готова к анализу.
На 14-й день планшет iOPC с плотностью 1 x 10 5 клеток на лунку в 24-луночном план
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео