Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:08 мин. • July 8th, 2025
Начнем с индуцированных человеком колоний плюрипотентных стволовых клеток, культивируемых на адгезивной матрице базальной мембраны.
Добавьте среду для дифференцировки мозжечка, содержащую специфический гормон, фактор роста и низкомолекулярные ингибиторы.
Приподнимите колонии с помощью стеклянной пипетки и переложите их на сверхнизкую насадочную пластину.
Поверхность с низким уровнем прикрепления поддерживает клетки во взвешенном состоянии, способствуя их агрегации в трехмерные эмбриоидные тельца, или БЭ.
Гормон, фактор роста и ингибиторы связываются с соответствующими центрами-мишенями, способствуя дифференцировке стволовых клеток в предшественники нейронов.
Перенесите БЭ в лунки культуральных планшетов, покрытых синтетическим полимером и адгезионным белком для облегчения прикрепления БЭ.
Замените среду средой для дифференцировки, не содержащей ингибиторов.
Клетки начинают мигрировать наружу из БЭ, образуя 2D-монослой.
Удалите среду и добавьте среду для созревания мозжечка.
Факторы роста в этой среде индуцируют созревание предшественников нейронов в отдельные предшественники нейронов мозжечка.
В нулевой день добавьте 1 миллилитр среды для дифференцировки мозжечка с добавлением 10 м
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео