Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:48 мин. • July 8th, 2025
Начните с фрагментов ткани ствола мозга, содержащих диффузную внутреннюю понтинную глиому – опухоль, полученную из глиальных клеток-предшественников в миелинизированной среде, богатой нервами.
Лечение протеолитическими ферментами для разрушения внеклеточного матрикса ткани.
После инкубации повторно пипетируйте содержимое, чтобы облегчить диссоциацию клеток и деградацию миелиновой оболочки.
Фильтр и центрифуга для сбора ячеек. Извлеките надосадочную жидкость и снова суспендируйте их в холодном буфере.
Добавьте раствор сахарозы для разделения градиента плотности и тщательно перемешайте.
Затем центрифугируйте для отделения более тяжелых клеток от более легких остатков миелина.
Удалите слой миелина и добавьте буфер для лизиса эритроцитов.
Добавьте холодный буфер, чтобы остановить действие лизиса. Центрифугуйте и удалите надосадочную жидкость, чтобы удалить лизированные эритроциты.
Ресуспендируйте клетки в теплой нейробазальной среде и культивируйте их в колбе без покрытия.
Отсутствие нейротропных факторов вызывает гибель нейронов, в то время как глиальные клетки-предшественники используют питательные вещества и факторы роста, что приводит к пролиферации. Добавляйте свежую среду для под
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео