Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:34 мин. • July 8th, 2025
Возьмем, к примеру, детеныша мыши Церебеллу.
Гомогенизируйте их на более мелкие фрагменты.
Добавьте протеолитический фермент для переваривания внеклеточного матрикса ткани, разрыхляя зернистые предшественники мозжечка, или CGNP, и астроциты.
Добавьте питательную среду CGNP, содержащую сыворотку, чтобы остановить ферментативную активность. Центрифугируйте и выбросьте богатую ферментами надосадочную жидкость.
Ресуспендируйте фрагменты ткани в средах CGNP. Механически диссоциируйте ткань, чтобы освободить клетки.
Как только мусор осядет, перенесите надосадочную жидкость, содержащую клетки, в новую пробирку.
Центрифугируйте и удалите надосадочную жидкость с мусором.
Ресуспендируйте клетки в среде CGNP и затравите их в лунки с несколькими лунками, покрытыми поли-D-лизином. Инкубировать.
Астроциты оседают и прочно прилипают к поли-D-лизиновому покрытию по сравнению с CGNP.
Встряхните планшет и соберите надосадочную жидкость, содержащую ГНП. Центрифугируйте и удалите надосадочную жидкость.
Ресуспендируйте CGNP в среде CGNP и затравите их на многолуночный планшет с поли-L-орнитиновым покрытием. Инкубировать.
CGNP прикрепляются к покрытой поверхности и размножаются с помощью компонентов сре
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео