Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:49 мин. • July 8th, 2025
Начните с мышцы крысиной головы и разрубите ее на фрагменты.
Добавьте коктейль из протеолитических ферментов и инкубируйте, слегка встряхивая.
Ферменты переваривают внеклеточный матрикс ткани, расслабляя мышечные волокна.
Добавьте среду, содержащую сывороточные белки, для инактивации ферментов.
Перенесите ткань в пробирку, центрифугу и выбросьте надосадочную жидкость.
Ресуспендия ткани в среде. Повторите механическое разрушение и центрифугирование дважды, чтобы получить однородную суспензию сателлитных клеток — стволовых клеток, имеющих решающее значение для восстановления и регенерации мышц.
Соберите сокровенную клетку, содержащую надосадочную жидкость.
Пропустите через клеточное ситечко, чтобы получить одноклеточную суспензию. Центрифугируйте, выбросьте надосадочную жидкость и повторно суспендируйте клетки в средах.
Капли клеточной суспензии поместите на лунки камеры с белковым покрытием из внеклеточного матрикса.
Поверхность с покрытием облегчает прикрепление сателлитной ячейки. Добавьте в лунки фильтрующий материал.
Факторы роста в среде индуцируют пролиферацию сателлитных клеток и дифференцировку в миобласты — предшественники мышечных клеток, которые в дальнейшем пролиферируют
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео