Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:27 мин. • July 8th, 2025
Возьмите адгезивные культуры первичных клеток-предшественников олигодендроцитов, или OPCs, в питательной среде.
Добавьте в контрольную лунку контрольные лентивирусные векторы и тестовые векторы, кодирующие сигнальные белки, регулирующие миелинизацию, в тестовую лунку, затем инкубируйте.
Клетки интернализуют векторы, а вирусная РНК обратно транскрибируется в ДНК и встраивается в геном хозяина, экспрессируя сигнальные белки в тестовых клетках.
Введите ферменты, чтобы отделить OPC от субстрата.
Нейтрализуйте ферменты и центрифугируйте для удаления ферментов.
Добавьте питательную среду и перенесите OPC на покровные стекла внутри микропланшета с прикрепленным ганглием дорсального корешка или нейронами DRG. Дайте OPC устояться.
Заполните лунки питательной средой и инкубируйте. Взаимодействие с нейронами DRG запускает созревание OPC в олигодендроциты.
Экспрессируемые сигнальные белки индуцируют олигодендроциты к образованию миелиновых оболочек вокруг нейронов DRG.
Оцените индуцированное сигнальным белком образование миелиновой оболочки в тестовых клетках по сравнению с клетками, трансдуцированными с помощью контрольного вектора.
Для этого протокола имеют первичные клетки-предшественники о
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео