Приготовление покрытых коллагеном компартментных культуральных чашек для культивирования нейрональных клеток

Начните с добавления коллагенового раствора в чашку для культивирования.

Кислый pH раствора предотвращает образование коллагенового матрикса.

Удалите излишки раствора.

Поставьте блюдо в поднос вместе с марлевой салфеткой, смоченной в гидроксиде аммония. Накройте крышкой пары аммиака.

Эти пары повышают pH, нейтрализуя кислую среду.

Нейтрализация нарушает электростатическое отталкивание между молекулами коллагена, позволяя им образовывать стабильную матрицу. Создайте горизонтальные царапины по центру.

Нанесите нереактивную смазку на основание камеры с отсеком.

Теперь приложите поцарапанную поверхность посуды к камере.

Переверните и нанесите смазку, чтобы закрыть центральное отделение.

Добавьте носитель для проверки на утечку. Закройте место утечки смазкой.

Таким образом, образуется трехкомпонентная система: центральный отсек для нейрональных клеток и боковой отсек для опухолей.

Нейрональные клетки растут вдоль царапин к боковым компартментам и образуют миелиновую оболочку на аксонах, облегчая изучение взаимодействия опухоли и клетки.

Чтобы собрать компартментированные посуды для культуры, разведите бульковый раствор коллагена до 500 мкг на миллилитр в стерильной дистиллированной воде