Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 4:25 мин. • July 8th, 2025
Возьмем, к примеру, колонии человеческих эмбриональных стволовых клеток, или чЭСК, культивируемых на поддерживающей матрице.
Аспирируйте среду и добавьте ферменты, которые разрушают матрицу.
Промойте для удаления ферментов. Затем добавьте среду и пипетку, чтобы вытеснить разрыхленные колонии, разбив их на более мелкие кластеры.
Переложите гроздья в свежую среду и инкубируйте, позволяя гроздям образовать сферические агрегаты.
Дайте сферам осесть и удалите все мертвые клетки.
Инкубируйте со средой, содержащей основной фактор роста фибробластов, или bFGF, для пролиферации клеток.
Восполняйте запасы с помощью сред, содержащих постепенно снижающиеся концентрации bFGF, для облегчения дифференцировки клеток.
Ввести нейронную индукционную среду, способствующую дифференцировке hESC в нейральные стволовые клетки или НСК, превращая сферы в органоиды с нейронной розеткообразной структурой.
Добавьте антибиотики, чтобы предотвратить рост любых загрязняющих микробов во время длительного культивирования.
НСК дифференцируются на нейроны и глию, постепенно развивая органоиды в сложную структуру, напоминающую кору головного мозга.
Разбавьте стоковый раствор протеазы до рабочей концентрации, добавив 1
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео