Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:52 мин. • July 8th, 2025
Возьмем собранные трансгенные периаортальные жировые ткани мыши, содержащие флуоресцентные белки, экспрессирующие жировые стволовые клетки, происходящие от клеток нервного гребня, или НКК.
Добавьте питательную среду и пропустите через мясорубку.
Переложите измельченную салфетку с питательной средой в трубочку. Механически диссоциируйте фрагменты.
инкубировать. Коллагеназа в среде переваривает внеклеточный матрикс ткани, высвобождая стволовые клетки, адипоциты и фибробласты.
Добавьте сыворотку, содержащую среду, чтобы остановить активность коллагеназы. Центрифугируйте и выбросьте надосадочную жидкость, содержащую адипоциты.
Повторно суспендируйте элементы в среде и отфильтруйте, чтобы удалить заполнители.
Центрифугируйте фильтрат и удалите надосадочную жидкость. Ресуспендируйте клетки в буфере для лизиса эритроцитов для лизирования эритроцитов.
Добавьте буфер, содержащий сыворотку, чтобы остановить лизис. Центрифугируйте и выбросьте надосадочную жидкость.
Снова суспендируйте ячейки в буфере.
Выполняйте сортировку клеток, активируемых флуоресценцией, для выделения флуоресцентных стволовых клеток.
Выделенные стволовые клетки могут быть использованы для дальнейших экспериментов.
Перело
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео