Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:45 мин. • July 8th, 2025
Возьмем мозг свиньи.
Удалите мозговые оболочки, защитную мембрану, покрывающую мозг, чтобы предотвратить загрязнение менингеальных клеток.
Соскребите серое вещество, область, богатую капиллярами, и соберите ткань в чашке для культур, содержащей среды.
Пропустите серое вещество через шприц без иглы, чтобы фрагментировать ткань.
Перенесите фрагменты в гомогенизатор и гомогенизируйте для дальнейшего разрушения ткани, освобождая капилляры мозга.
Пропустите гомогенат через фильтр с определенным размером пор, чтобы сохранить капилляры, позволяя другим клеткам мозга проходить через них.
Поместите фильтр в раствор, содержащий ферменты и ДНКазу.
Ферменты отделяют адгезивные клетки, в то время как ДНКаза разрушает загрязняющую ДНК, способствуя выделению чистых капилляров.
Промойте капилляры от фильтра.
Добавьте среду, содержащую сывороточные белки, для инактивации ферментов.
Перенесите капилляры в пробирку, центрифугу и удалите надосадочную жидкость. Суспендируйте чистые капилляры в свежих средах для дальнейшего анализа.
Чтобы начать эту процедуру, поместите мозги на стерильную скамейку, и аккуратно промойте их 1 литром PBS в стакане, помещенном на лед. Затем осторожно удалите мозговые оболо
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео