Выделение первичных олигодендроцитов мышей с помощью иммуномагнитных шариков

Возьмите суспензию нервных клеток, включая незрелые олигодендроциты и первичные нейрональные клетки, от щенка мыши.

Повторно суспендируйте клетки в магнитном буфере для сортировки клеток, чтобы избежать слипания клеток.

Добавьте сконструированные магнитные микрогранулы, несущие на своей поверхности антитела против O4. Перемешивайте раствор, чтобы обеспечить равномерное перемешивание.

Инкубируйте для того, чтобы микрогранулы могли связываться с сульфатированным галактолипидом, антигеном O4 на олигодендроцитах, в то время как другие клетки остаются несвязанными или слабо связанными.

Промойте смесь с дополнительным буфером для сортировки ячеек.

Центрифугируйте и выбросьте надосадочную жидкость, затем снова суспендируйте клетки.

Затем пропустите связанные с шариками клетки в магнитную разделительную колонку, оснащенную фильтром, который удаляет большие скопления клеток.

Во время пробега под действием магнитного поля связанные с шариками комплексы движутся к магниту, прикрепляясь к боковым сторонам.

Промойте, чтобы удалить несвязанные и слабо связанные клетки.

Извлеките колонку из сепаратора и промойте ее пролиферативной средой, чтобы собрать первичные олигодендроциты для будущих примен