Получение микроструктурированного субстрата для изучения фенотипов шванновских клеток

Возьмите кремниевую пластину с микроузорами нужной геометрии, чтобы вырастить ячейки определенной формы.

Залейте его полимерной смесью и дайте ей застыть.

Вырежьте квадратный штамп из полимера.

Покройте узорчатую поверхность штампа белковым слоем, который облегчает прикрепление клеток.

С помощью воздушной струи удалите неограниченные белки.

Возьмите покров с полимерным покрытием.

Поместите на него узорчатую сторону штампа.

Нажмите на штамп, чтобы перенести узор. Снимите штамп.

Перенесите покровную крышку в лунку, содержащую поверхностно-активное вещество, чтобы покрыть оголенные поверхности. Это повышает поверхностную гидрофобность, предотвращая нежелательную адгезию клеток.

Удалите поверхностно-активное вещество и промойте фосфатным буфером.

Добавьте шванновские клетки и дайте им прикрепиться к микроузору.

Вымойте буфером, чтобы удалить неприкрепленные ячейки.

Добавьте питательную среду и инкубируйте.

По мере того, как клетки растут вдоль поверхности, они принимают форму микроузора, что позволяет изучать фенотип шванновских клеток.

Чтобы приготовить микроструктурированную подложку, поместите кремниевую пластину с рисунком внутрь круглой чашки Петри диаметром 150 мм и высотой 15 мм