Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:45 мин. • July 8th, 2025
Возьмите нервный корешок и нарежьте его небольшими кусочками.
Переложите в пробирку, содержащую пищеварительные ферменты, и инкубируйте.
Фермент переваривает внеклеточный матрикс.
Добавьте среду, содержащую сыворотку, чтобы остановить пищеварение.
Повторно пипетируйте содержимое, затем центрифугируйте и выбросьте надосадочную жидкость.
Снова суспендируйте гранулу.
Пропустите суспензию через ситечко, чтобы удалить непереваренную ткань. Инкубируйте собранные клетки в тарелке.
Фибробласты и шванновские клетки или СК прикрепляются к пластине и делятся.
Удалите неприкрепленные ячейки. Промойте прикрепленные клетки фосфатным буфером.
Добавьте пищеварительные ферменты, чтобы ослабить чувствительные к пищеварению СК. Остановите пищеварение с помощью среды.
Полностью отсоедините SC, добавив носитель.
Переложите ячейки в пробирку и центрифугу. Отбросьте надосадочную жидкость и ресуспендируйте клетки в средах, специфичных для СК.
Перенесите клетки в непокрытую пластину и инкубируйте.
Любые оставшиеся фибробласты прилипнут, оставляя СК во взвешенном состоянии.
Перенесите суспензию на пластину с матричным покрытием.
Инкубация для прикрепления и деления шванновских клеток.
Разрежьте нервы на кус
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео