Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:05 мин. • July 8th, 2025
Возьмите мозг мыши в ледяной буфер и удалите его заднюю часть, содержащую мозжечок, и переднюю часть с медиальной префронтальной корой, или mPFC.
Средняя часть содержит области миндалевидного тела, которые обрабатывают такие эмоции, как страх и тревога.
Переместите мозговую секцию на фильтровальную бумагу, чтобы удалить лишний буфер.
Приклейте его к столику и закрепите агаровый блок позади секции, чтобы предотвратить его смещение во время нарезки.
Поместите эту ступень в камеру вибратомной резки с ледяным буфером.
Разрежьте срез, чтобы получить тонкий корональный срез мозга.
При этом обнажаются области миндалевидного тела, которые содержат синаптические связи между нейронами миндалевидного тела и проекциями нейронов mPFC, которые регулируют реакции миндалевидного тела.
Разрежьте ломтик на две половины, каждая из которых содержит область миндалевидного тела.
Затем перенесите их в интерфейсную камеру, содержащую насыщенную кислородом искусственную спинномозговую жидкость.
Восстановите срезы при физиологической температуре для поддержания жизнеспособности нейронов.
После получения мозга с помощью скальпеля удалите мозжечок и внутреннюю часть мозга, а затем охладите среднюю часть мозга в ледяном растворе для резки, как и раньше. Промокните мозг фильтровальной бумагой, а затем приклейте его к вибратомной стадии.
Опять же, закрепите дополнительный блок агара за мозгом для устойчивости во время нарезки. После установки предметного столика в режущую камеру, заполненную режущим раствором с температурой 4 градуса Цельсия, разрежьте корональные срезы размером 320 микрон через миндалевидное тело. Разрежьте их пополам и соберите секции в интерфейсной камере, как и раньше.