Создание коронального среза мозга, обнажающего области миндалевидного тела из мозга мыши

Возьмите мозг мыши в ледяной буфер и удалите его заднюю часть, содержащую мозжечок, и переднюю часть с медиальной префронтальной корой, или mPFC.

Средняя часть содержит области миндалевидного тела, которые обрабатывают такие эмоции, как страх и тревога.

Переместите мозговую секцию на фильтровальную бумагу, чтобы удалить лишний буфер.

Приклейте его к столику и закрепите агаровый блок позади секции, чтобы предотвратить его смещение во время нарезки.

Поместите эту ступень в камеру вибратомной резки с ледяным буфером.

Разрежьте срез, чтобы получить тонкий корональный срез мозга.

При этом обнажаются области миндалевидного тела, которые содержат синаптические связи между нейронами миндалевидного тела и проекциями нейронов mPFC, которые регулируют реакции миндалевидного тела.

Разрежьте ломтик на две половины, каждая из которых содержит область миндалевидного тела.

Затем перенесите их в интерфейсную камеру, содержащую насыщенную кислородом искусственную спинномозговую жидкость.

Восстановите срезы при физиологической температуре для поддержания жизнеспособности нейронов.

После получения мозга с помощью скальпеля удалите мозжечок и внутреннюю часть мозга, а затем охладите среднюю часть мозга