Создание чипа гематоэнцефалического барьера с использованием клеток-предшественников, полученных из iPSC

Возьмем микрофлюидный чип с наложенными друг на друга каналами с матричным покрытием, разделенными пористой мембраной.

Засейте нейронные клетки-предшественники, полученные из iPSC, в верхнем канале. Инкубируйте для прилипания клеток, затем промойте, чтобы удалить неприкрепленные клетки.

Затем засейте микрососудистые эндотелиальные клетки головного мозга, полученные из иПСК, в нижний канал.

Переверните чип и инкубируйте его, чтобы прикрепить эндотелиальные клетки к мембранной стороне нижнего канала.

Затем переверните чип, чтобы прикрепить ячейки к нижней стороне канала, образуя однослойную трубчатую структуру. Промойте оба канала фильтрующим материалом для конкретных клеток.

Непрерывно протекает нейронная среда дифференцировки в верхнем канале и среда эндотелиальных клеток в нижнем канале.

Эндотелиальные клетки используют факторы роста от среды до зрелых и образуют плотные соединения, напоминающие кровеносный сосуд, формируя кровеносную сторону.

Нейротрофические факторы стимулируют дифференцировку нейронных клеток-предшественников в различные клетки мозга, формируя мозговую сторону. Эти клетки взаимодействуют с эндотелиальными клетками, создавая гематоэнцефалический барьер на чипе.