Приготовление срезов коры рида и гиппокампа из мозга щенка крысы

Возьмите только что собранный мозг крысиного щенка тыльной стороной вверх в культуральной тарелке с охлажденным буфером.

Откройте полушария мозга и удалите ткани, покрывающие гиппокамп.

Надрежьте полушария так, чтобы в них находились гиппокамп и ринальная кора.

Положите оба полушария гиппокампом вверх и параллельно на фильтровальную бумагу.

Перенесите этот узел на измельчитель тканей лезвием перпендикулярно полусферам.

Нарежьте полусферы до необходимой толщины для получения срезов и переложите их в культуральную тарелку с охлажденным буфером.

Аккуратно отделите срезы и рассеките их, чтобы включить в них структурно неповрежденные области коры гиппокампа и ринального налета.

Переложите срезы в мембранные вставки в многолуночную пластину, содержащую среду.

Удалите излишки буфера из срезов и инкубируйте их для восстановления тканей.

Обновите носители. Срезы могут быть использованы для дальнейшего анализа.

Перенесите мозг тыльной стороной вверх в 60-миллиметровую пластину, содержащую 5 миллилитров холодного ГБСС. Введите в мозжечок тонкие щипцы, а шпатель введите по средней линии, чтобы осторожно открыть полусферу. С помощью коротких изогнутых щипцов аккуратно удалите лишнюю ткань, покр